Caracterización de Lipopolisacárido en una cepa mutante de Leptospira Interrogans Serovar Lai

Description: A lipopolysaccharide (LPS) mutant of Leptospira interrogans serovar Lai was selected using a monoclonal antibody F70C711 against one O antigen epitope. Absence of this epitope in the mutant strain was demonstrated by MAT (microscopic agglutination test) and western blot analysis. SDS-PAGE profiles of both wild type and mutant strains showed a loss of molecular mass in the band corresponding to the O antigen, in the mutant strain. Additionally, the results of PCR and sequencing of locus rfb of the mutant strain confirmed that orf 14 was truncated; the putative function of this gene is an O antigen polymerase.
Un mutante de lipopolisacárido (LPS) de Leptospira interrogans serovar Lai fue seleccionado utilizando el anticuerpo monoclonal F70C711 que reacciona con un epitopo del antígeno O de LPS. La ausencia de este epitopo en la cepa mutante fue demostrada por el ensayo de aglutinación microscópica (MAT) y el análisis de western blot. Los perfiles electroforéticos (SDS-PAGE) de las cepas original y mutante, mostraron que la cepa mutante a experimentado una pérdida de masa molecular en la banda que corresponde a la región del antígeno O. Los resultados de PCR y secuenciamiento de los genes del locus rfb confirmaron que la cepa mutante tiene el marco de lectura abierto (orf) 14 truncado y la función putativa para este gen es de una enzima polimerasa de antígeno O.