Utilización de técnicas de PCR para el subclonamiento de fragmentos de Leptospira de una biblioteca en Lambda

Description: The interest of pathogenic microbial genomics has focused in the identification of genes present in virulent bacteria strains and absent in the avirulent counterparts. Genomic libraries from bacteriofage Lambda and a differential hybridization process have been used in order to achieve this goal, however the main challenge with this approach remains on the possibility of obtaining to obtain high quality DNA, suitable for sequencing. This study aimed to resolve this problem by using a two steps PCR procedure, based on the combination of specific primers, such as T7 and T3, and a non specific one called BC740.
El interés por entender la genómica de los microorganismos patógenos se ha enfocado en la identificación y el estudio de los genes presentes en estos y de cierta forma ausente en los microorganismos que no causan enfermedad. Para este propósito se emplearon bibliotecas genómicas con ADN de Leptospira procedentes del bacteriófago Lambda y técnicas de hibridación diferencial. Una de las complicaciones que presentan las bibliotecas genómicas es la dificultad en la obtención de fragmentos de ADN secuenciable. El presente trabajo describe una técnica basada en PCR que resolvería este problema.

Topic: Leptospira - Clonación
Genética Bacteriana
Microbiología - Investigación
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MICROBIOLOGÍA